Uloga proteina SUFU u povezivanju Wnt i Hedgehog signalnoga puta u posteljica s intrauterinim zastojem u rastu

disertacija

• Naslov (engleski): SUFU protein's function in connecting Wnt and Hedgehog signaling pathways in placentas with intrauterine growth restriction
• Autor: Ida Marija Šola
• Mentor: Ljiljana Šerman (mentor)
• Mentor: Krunoslav Kuna (komentor)
• Član povjerenstva: Floriana Jakuš (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Božo Krušlin (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Josip Juras (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Medicinski fakultet; Zagreb
• Datum i država obrane: 2024-02-23, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Temeljne medicinske znanosti; Genetika, genomika i proteomika čovjeka
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Kliničke medicinske znanosti; Ginekologija i opstetricija
• Univerzalna decimalna klasifikacija (UDC): 616 - Patologija. Klinička medicina

Sažetak

Jedan od najčešćih uzroka intrauterinog zastoja u rastu (IUGR) je nedostatna funkcija posteljice. IUGR se pojavljuje u oko 10% trudnoća te uzrokuje povećanje fetalnog i neonatalnog morbiditeta i mortaliteta. Unatoč presudnoj ulozi signalnih puteva Wnt i Hedgehog (Hh) u embrionalnom razvoju te razvoju posteljice, njihova uloga u nastanku IUGR-a još nije dovoljno istražena. U ovoj je studiji analizirana ekspresija pozitivnih regulatora signalnog puta Wnt, proteina WNT5A i β-katenina, te ekspresija proteina SUFU koji je negativni regulator signalnog puta Hh,. Proteinska ekspresija je analizirana imunohistokemijom (IHC) u uzorcima 34 posteljice s IUGR-om te 18 posteljica iz urednih jednoplodnih terminskih trudnoća te dodatno provjerena na razini mRNA metodom analize reverzne transkripcije i kvantitativne lančane reakcije polimerazom (RT-qPCR). Epigenetski mehanizmi regulacije ekspresije gena SUFU istraženi su određivanjem metilacijskog obrasca DNA u promotoru gena SUFU PCR- om ovisnim o metilaciji (MSP) te RT-qPCR analizom ekspresije miR-214-3p i miR-378a-5p. Proteinska ekspresija WNT5A je bila viša u endotelnim stanicama posteljičnih resica kod IUGR-a u odnosu na kontrolnu skupinu. Proteinska ekspresija β-katenina je bila povišena u trofoblastu i endotelnim stanicama kod IUGR-a, dok je proteinska ekspresija SUFU bila povišena u trofoblastu posteljica s IUGR-om. Promotor gena SUFU je ostao nemetiliran u obje skupine, dok je kod posteljica s IUGR-om nađena smanjena ekspresija miR-214-3p i miR-378a-5p. Povišena proteinska ekspresija SUFU u posteljica s IUGR-om u kontekstu također povišene proteinske ekspresije WNT5A i β-katenina potvrđene i korelacijskom analizom proteinske ekspresije β-katenina i SUFU ukazuje na moguću ulogu SUFU kao pozitivnog i negativnog regulatora u integriranju signalnih puteva Wnt i Hh u posteljica s IUGR-om. Čini se da bi miRNA, a ne DNA metilacija, mogao biti epigenetski mehanizam u reguliranju genske ekspresije SUFU u patogenezi posteljica sa IUGR-om.

Sažetak (engleski)

Placental insufficiency is one of the most common causes of intrauterine growth restriction (IUGR). IUGR affects ~10% of preg-nancies and increases fetal and neonatal morbidity and mortality. Although Wnt and Hh pathways are crucial for embryonic development and placentation, their role in the pathology of IUGR is still not sufficiently explored.
The present study analyzed the expression of positive regulators of the Wnt signaling pathway, WNT5A, and β‑catenin, and the expression of the Hh signaling pathway negative regulator, suppressor of fused (SUFU). Immunohistochemical and reverse transcription‑quantitative PCR (RT‑qPCR) assays were performed on 34 IUGR and 18 placental tissue samples from physiologic singleton term-pregnancies. Epigenetic mechanisms of SUFU gene regulation were also investigated by methylation‑specific PCR analysis of its promoter and RT‑qPCR analysis of miR‑214‑3p and miR‑378a‑5p expression. WNT5A protein expression was higher in endothelial cells of placental villi from IUGR group compared with controls. That was also the case for the expression of β-catenin protein in trophoblasts and endothelial cells and SUFU protein in trophoblasts from IUGR placentas. The SUFU gene promoter remained unmethylated in all tissue samples, while miR‑214‑3p and miR‑378a‑5p were downregulated in IUGR. The present results of higher SUFU protein expression in IUGR placentas in the context of higher WNT5A and β-catenin protein expression confirmed with SUFU and β-catenin protein expression correlation analysis suggest a possible function of SUFU as both a positive and negative regulator in the integration of Wnt and Hh signaling in IUGR. DNA methylation did not appear to be a mechanism of SUFU regulation in the pathogenesis of IUGR, but its expression could be regulated by miRNA targeting.

• Ključne riječi: intrauterini zastoj u rastu - IUGR; posteljica; WNT5A; β-katenin; SUFU; signalni put Wnt; signalni put Hh; DNA metilacija; miRNA
• Ključne riječi (engleski): intrauterine growth restriction - IUGR; placenta; WNT5A; β-catenin; SUFU; Wnt signaling pathway; Hh signaling pathway; DNA methylation; miRNA
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:105:517468
• Projekt: Šifra: KK.01.1.1.01.0008; Naziv: Reproduktivna i regenerativna medicina - istraživanje novih platformi i potencijala; Voditelj: Ana Katušić Bojanac; Pravna nadležnost: Hrvatska; Financijer: MZO
• Studijski program: Naziv: Biomedicina i zdravstvo; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: poslijediplomski doktorski; Akademski / stručni naziv: doktor/doktorica znanosti, područje biomedicine i zdravstvo (dr. sc.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Opseg: 133 str.
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2024-03-12 08:32:03