Metilacija RB1 i H19 gena te LINE 1 ponavljajućih sljedova tijekom fetalnog razvoja sjemenika u čovjeka i u štakora

disertacija

• Naslov (engleski): Methylation of RB1, H19 genes and LINE 1 repetitive sequence during fetal development of testis in man and in rat
• Autor: Marta Himelreich Perić
• Mentor: Ana Katušić Bojanac (mentor)
• Član povjerenstva: Davor Ježek (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Floriana Jakuš (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Marko Hohšteter (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Medicinski fakultet; Zagreb
• Datum i država obrane: 2022-10-06, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Temeljne medicinske znanosti; Medicinska biokemija
• Univerzalna decimalna klasifikacija (UDC): 616 - Patologija. Klinička medicina

Sažetak

Neki od uzroka muške neplodnost mogu imati ishodište u epigenetičkim poremećajima tijekom prenatalnog života. Cilj disertacije bio je istražiti DNA metilaciju LINE-1 transpozonskih ponavljajućih sljedova i diferencijalno metilirane regije (DMR) utisnutog gena H19 u tkivu fetalnog sjemenika čovjeka i štakora te RB1 tumorsupresorskog gena u čovjeka usporedno sa staničnom proliferacijom i izražajem tumor supresora RB1 te njegovih fosforiliranih oblika. DNA metilacija u fetalnom štakorskom sjemeniku značajno raste za LINE-1 od 16.5 do 21.5 dpc, a za H19 do 17.5 dpc. Analiza ljudskih uzoraka pokazuje visoku razinu metilacije LINE-1 tijekom trudnoće te značajno sniženje u pubertetu, a za H19 rast do kraja trudnoće, dok je RB1 tijekom trudnoće hipometiliran (ispod 5%). Izražaj biljega proliferacije Ki-67 u štakorskom sjemeniku značajno se smanjuje od 16.5 do 19.5 dpc kao i izražaj fosforiliranih RB1 proteina u odnosu na ukupan broj stanica i promjer kanalića, a zatim se povisuje (19.5 - 20.5 dpc). U ljudskim sjemenicima izražaj Ki-67 i fosforiliranih oblika RB1 u odnosu na ukupan broj stanica i promjer kanalića pada od prvog prema drugom tromjesječju, a od drugog prema trećem raste ukupni RB1 i dio fosforiliranih formi. Rezultati ovog rada značajni su kao baza za daljnje istraživanje uzroka neplodnosti ili tumora sjemenika koji mogu biti uzrokovani promjenom metilacije gena koji djeluju na stabilnost genoma, genomsko utiskivanje i regulaciju staničnog ciklusa.

Sažetak (engleski)

Some of the causes of male infertility may have their origin in epigenetic disorders during prenatal life. The aim of the study was to investigate DNA methylation of LINE-1 transposon repetitive sequences and the imprinted differentially methylated region (DMR) of H19 gene in human and rat fetal testis and the RB1 tumor supressor gene in humans in parallel with the expression of RB1 protein and its phosphorylated forms. DNA methylation in the fetal rat testis increases significantly for LINE-1 from 16.5 to 21.5 dpc, and for H19 to 17.5 dpc. Analysis of human samples showed a high level of LINE-1 methylation during pregnancy with a significant decrease in puberty, and for H19 an increase until the end of pregnancy, while RB1 was hypomethylated during pregnancy (below 5%). The expression of Ki-67 proliferation marker in the rat testis is significantly reduced from 16.5 to 19.5 dpc as well as the expression of phosphorylated RB1 proteins from 16.5 and 19.5 relative to total cell number and tubular diameter, and is increased from 19.5 to 20.5. In human testes, the expression of Ki-67 and phosphorylated RB1 in relation to the total number of cells and the diameter of the tubules decreases from the first to the second trimester, and from the second to the third the total RB1 and a part of the phosphorylated forms increase. The results of this work are important as a basis for further research into the causes of infertility or testicular tumors that may be caused by altered methylation of genes that affect genome stability, genomic imprinting, and cell cycle regulation.

• Ključne riječi: Genomski otisak; DNK metilacija; Ki-67 antigen; Tromjesečje trudnoće; drugo; Neplodnost; muškarac; Ponavljajuće sekvence; nukleinska kiselina; Neoplazme testisa; Genomska nestabilnost; Proliferacija stanica; Broj stanica; Stanični ciklus; Pubertet
• Ključne riječi (engleski): Genomic Imprinting; DNA Methylation; Ki-67 Antigen; Pregnancy Trimester; Second; Infertility; Male; Repetitive Sequences; Nucleic Acid; Testicular Neoplasms; Genomic Instability; Cell Proliferation; Cell Count; Cell Cycle; Puberty
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:105:820020
• Projekt: Šifra: KK.01.1.1.01.0008; Naziv: Reproduktivna i regenerativna medicina - istraživanje novih platformi i potencijala; Voditelj: Ana Katušić Bojanac; Pravna nadležnost: eu; Financijer: MZO
• Studijski program: Naziv: Biomedicina i zdravstvo; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: poslijediplomski doktorski; Akademski / stručni naziv: doktor/doktorica znanosti, područje biomedicine i zdravstvo (dr. sc.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Opseg: 181 str.
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup; Datum isteka embarga: 2024-10-06
• Datum i vrijeme pohrane: 2022-11-29 12:14:03